Les caryotypes sur moelle osseuse ont commencé en 1995 suite à la demande des médecins hématologues et oncologues.

La pathologie concernée est surtout hématologique : Leucémies aiguës et chroniques, myélodysplasies, anémies, syndromes myéloprolifératifs, anémies de Fanconi…

L’obtention du caryotype médullaire est nécessaire à l’établissement ou à la confirmation du diagnostic, et les aberrations chromosomiques retrouvées ont une valeur pronostique et peuvent être à la base d’une demande de greffe. Le caryotype médullaire est aussi nécessaire à la surveillance du traitement et à la détection de la maladie résiduelle et des rechutes.

La progression des demandes de caryotypes médullaires pour diagnostic et suivi de la maladie est régulière, avec un nombre moyen de 350 cas/an. L’accroissement relativement important de ceux qui sont demandés pour la surveillance des maladies témoigne de l’efficacité de la thérapeutique.

La technique ayant des contraintes de temps et de conditions de mise en culture, un accord doit être passé entre clinicien et biologiste pour fixer le moment le plus favorable à la réception du prélèvement. Chaque examen demande l’étude de 20 à 50 métaphases. L’équipe en charge des caryotypes médullaires est constituée de trois personnes dont Mlle Noëlle SOURATY,M.S., responsable de cette section.

Protocole de prélèvements + Fiche de Renseignements

La cytogénétique conventionnelle pouvant ne pas détecter toutes les aberrations existantes, nous développerons des techniques complémentaires et déjà éprouvées ailleurs :

-La FISH ( Fluorescent In Situ Hybridisation) qui utilise des sondes ADN fluorescentes spécifiques de chaque aberration. Deux stages en France ont permis à deux personnes de l’équipe de s’initier à cette technique. Elle a été mise en place début 2004 et pourra détecter les anomalies les plus fréquemment rencontrées dans les hémopathies ( t(9;22), t(15;17), chromosomes sexuels…). Dans notre laboratoire elle est déjà utilisée pour la surveillance des allogreffes de sexe différent.

-La RT-PCR qualitative pour la t(9;22) a été mise en place courant 2003. Ce test, réalisé en complément du caryotype, permet de détecter un transcrit de fusion dans les Leucémies Myéloïdes Chroniques. Ce test permet ainsi un diagnostic précis et il est notamment très utile dans la surveillance de l’évolution de la maladie. Courant 2004, la détection par RT-PCR de la translocation (15;17) fréquente dans les Leucémies Aiguës Myéloïdes de type M3 va être mise en place.

Anomalies détectées par cytogénétique :
1. Translocations
2. Délétions
3. Inversions
4. Duplications
5. Aberrations de nombre

Techniques utilisées :
1. Bandes R
2. FISH
3. RT-PCR qualitative